現在越來越多的人開始使用組織培養育苗技術,如今已經得到廣泛應用。關於組織培養育苗技術種類眾多,今天就來具體瞭解它的種類和配製。還不太熟悉的朋友們,一起來學習一下吧!
1。培養基的組成和pH
培養基是決定植物組織培養成敗的關鍵因素之一。常見的培養基主要有兩種,分別是固體培養基和液體培養基,二者的區別在於是否加入了凝固劑。
(1)水分
作為生命活動的物質基礎存在。培養基的絕大部分物質為水分。實驗研究中常用的水為蒸餾水,而最理想的水應該為純水,即二次蒸餾的水。生產上,為了降低成本,我們可以用高質量的自來水或軟水來代替。
(2)無機鹽類
植物在培養基中可以吸收的大量元素和微量元素都是來自於培養基中的無機鹽。培養基中提供的無機鹽主要有硝酸銨、硝酸鉀、硫酸銨、氯化鈣、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉等,不同的培養基配方當中其含量各不相同。
(3)有機營養成分
包括糖類物質,主要用於提供碳源和能源,常見的有蔗糖、葡萄糖、麥芽糖、果糖;維生素類物質,主要用於植物組織的生長和分化,常用的維生素有鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、生物素等;氨基酸類物質,常見的有甘氨酸、絲氨酸、谷氨醯胺、天冬醯胺等,有助於外植體的生長以及不定芽、不定胚的分化促進。
(4)植物生長調節物質
植物生長調節物質在培養基中的用量很小,但是其作用很大。它不僅可以促進植物組織的脫分化和形成愈傷組織,還可以誘導不定芽、不定胚的形成。最常用的有生長素和細胞分裂素,有時也會用到赤黴素和脫落酸。
(5)天然有機新增物質
香蕉汁、椰子汁、土豆泥等天然有機新增物質,有時會有良好的效果。但是這些物質的重複性差,還會因高壓滅菌而變性,從而失去效果。
(6)凝固劑
要進行固體培養,要在培養基中加入凝固劑。常見的有瓊脂和卡拉膠,用量一般在7~10克/升之間。前者生產中常用,後者透明度高,但價格貴。
(7)其他新增物
有時為了減少外植體的褐變,需要向培養基中加入一些防褐變物質,如活性炭、維生素C等。還可以新增一些抗生素物質,以此來抑制雜菌的生長。
(8)pH
培養基的pH也是影響植物組織培養成敗的因素之一。pH的高低應根據所培養的植物種類來確定,pH過高或過低,培養基會變硬或變軟。生產上或實驗中,常用氫氧化鈉或鹽酸進行調節。
2。培養基的種類
培養基有許多種類,根據不同的植物和培養部位及不同的培養目的需選用不同的培養基。目前國際上流行的培養基有幾十種,常用的培養基及特點如下。
(1)MS培養基
特點是無機鹽和離子濃度較高,為較穩定的平衡溶液。其養分的數量和比例較合適,可滿足植物的營養和生理需要。它的硝酸鹽含量較其他培養基為高,廣泛地用於植物的器官、花葯、細胞和原生質體培養,效果良好。有些培養基是由它演變而來的。
(2)White培養基
特點是無機鹽數量較低,適於生根培養。
(3)B5培養基
特點是含有較低的銨,這可能對不少培養物的生長有抑制作用。從實踐得知有些植物在B5培養基上生長更適宜。
(4)N6培養基
特點是成分較簡單,硝酸鉀和硫酸銨含量高。在國內已廣泛應用於小麥、水稻及其他植物的花葯培養和其他組織培養。
加入培養基的營養成分一般需先配製成母液備用,現在有配好的各種培養基幹粉。一般現成的培養基幹粉中加了營養成分和瓊脂,也有沒加瓊脂的,根據需要購買。
3.培養基的配製步驟
一般來講,任何一種培養基的配製步驟都是大致相同的。配1升MS培養基的具體操作如下。
①取一大燒杯或鋁鍋,放入約900毫升的水,然後加入MS培養基幹粉40毫克(具體用量根據培養基瓶上說明),並不斷攪拌,使其溶解。
②將加熱溶解好的培養基溶液倒入帶刻度的大燒杯中,加入培養所需的植物生長調節物質,定容到1升。
③用1摩爾/升的氫氧化鈉溶液(或稀鹽酸)調整pH。
④分裝到培養容器中(培養瓶)。
⑤高壓蒸汽滅菌鍋滅菌20分鐘(溫度為121℃,壓力為107千帕),出鍋晾涼備用。
看完了上面的內容,培養基的種類和配製你瞭解了嗎?希望今天小編分享給大家的內容,對各位正在種植蔬菜的朋友,能有所幫助。