DuRed核酸染料(10,000×水溶液)
DuRed核核酸染料特點：
1.無毒性：
DuRed
獨特的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內，艾姆斯氏試驗結果也表明，該染料的誘變性遠遠小於
EB
。
2.靈敏度高：
適用丁於各種大小片斷的電泳染色，對核酸遷移的影響小於
SYBR Green I
。
3.穩定性高：
適用於使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠；室溫下在酸或鹼緩衝液中極其穩定
，
耐光性強。
4.信噪比高：
樣品熒光訊號強，背景訊號低。
5.操作簡單：
與
EB
一樣
，
在預製膠和電泳過程中染料不不降解；而電泳後染色過程也只需
30
分鐘且無需脫色或沖洗，即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
6.適用範圍廣：
可選擇電泳前染色
（
膠染法
）
或電泳後染色
（
泡染法
）
；適用於瓊脂糖凝膠或聚丙烯醯胺凝膠電泳；可用於
dsDNA
、
ssDNA
或
RNA
染色。
7.與EB有相同的光譜特性，無需改變濾光片及觀察裝置：
標準的
EB
濾光片或
SYBR
濾光片都適用，使用與觀察
EB
相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在
300nm
紫外光附近可得到最佳激發。但是
DuRed
不能被
488nm
離子鐳射器或相似波長的可見光完全激發，因此不推薦使用此類激發裝置的成像系統。對於此類裝置，我們推薦您使用
DuGreen（Cat#011
或
012）
，它和
SYBR Green I
的光譜相似，靈敏度相當，但更加穩定。
Dured使用方法簡介:
1。
膠染法
(用法同EB)(推薦方法)
（
1
）
制膠時加入
DuRed
核酸染料
（
例如
：
每
50mL
瓊脂糖溶液中加入
5μL DuRed 10，000×
儲液，以此比例類推
）
。
（
2
）
按照常規方法進行電泳。
注意事項:
a。
此方法染色染料用量相對較少。
500μL
染料大約可以做
100
塊
50mL
的膠。
b。
由於
DuRed
具有良好的熱穩定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接新增，而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振盪或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將
DuRed
儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩衝液中，然後用微波爐或其他常用方式加熱以製備瓊脂糖凝膠。
DuRed
相容所有常用的電泳緩衝溶液。
c。
如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色後問題依舊存在，則說明問題與染料無關，請嘗試
：
降低瓊脂糖濃度；選用更長的凝膠；延長凝膠時間以保證邊緣清晰；改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
d。
此方法不適合預製聚丙烯醯胺凝膠，對於聚丙烯醯胺凝膠請使用泡染法。
2。
泡染法
（
1
）
按照常規方法進行電泳。
（
2
）
用
H
2
O
將
DuRed 10，000×
儲液稀釋約
3，300
倍到
0。1 M NaCl
中，製成
3×
染色液。
（
例如將
15μL DuRed 10，000×
儲液和
5ml 1M NaCl
加到
45ml H
2
O
中
）
。
（
3
）
將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的
3×
染色液浸沒凝膠。室溫振盪染色
30min
左右，最佳染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對於含
3。5
～
10%
丙烯醯胺的凝膠，染色時間通常介於
30min
到
1h
，並隨丙烯醯胺含量增加而延長。
注意事項:
1。
用泡染法染色時，染料用量較多。單次使用的染色液可重複使用
3
次左右。
2。 3× DuRed
染色液可以大量製備，在室溫下避光儲存直至用完。
特別提醒:
1。
如果您使用的是紫外成像儀，請選擇
DuRed
：如果您使用鐳射成像儀或希望在可見光下觀測，請選擇
DuGreen
。
2。
在極少數情況下，質粒經某些酶切後的
DNA
樣品會出現拖尾和解析度降低，此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。
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